La demanda actual de alimentos funcionales y nutraceúticos se ha incrementado en los últimos años, particularmente en el caso de los prebióticos cuyo crecimiento anual se estima en 10%. Los prebióticos son compuestos no digeribles que favorecen el crecimiento selectivo de bacterias benéficas como lactobacilo y bifidobacterias lo que mejora la salud del sistema gastrointestinal, sistema inmune, reducción de los riesgos de diabetes, enfermedades cardiovasculares y cáncer. Publicaciones recientes han mostrado que los pectooligosacaridos (POS) obtenidos a partir de pectina hidrolizada. Pectina cítrica comercial será purificada en etanol a pH ácido y a 4 °C con el fin de obtener pectina “high methoxyl” (HM). La pectina HM será sometida a desesterificación alcalina, con solución de NaOH 0.1 N a 4 °C por tiempos de 16 y 72 h para obtener pectina “low methoxyl” (LM) y ácido poligalacturónico (APG), respectivamente. Para la obtención de POS se realizará hidrolisis enzimática. Los sustratos serán las pectinas HM que será hidrolizada con pectín liasa y pectinas LM y APG que serán hidrolizados con pectato liasa y poligalacturonasa, todas las hidrólisis serán realizadas a pH 5.0 y 50 °C. Se evaluará tres tiempos de reacción: 6, 12 y 24 h. Los POS obtenidos serán purificados mediante ultrafiltración/diafiltración. Los POS obtenidos serán caracterizados por su peso molecular, grado de polimerización, perfil de oligosacáridos, composición en azúcares neutros, capacidad antioxidante ABTS y ORAC. Todos los POS obtenidos serán evaluados por sus características prebióticas, para ello se empleará diferentes lactobacilos y bifidobacterias (L. plantarum, L. casei, L. rhamnosus y B. bifidum). La fermentación se realizará en condiciones microaerobias y anaerobias, para los lactobacilos con medio MRS y para bifidobacteria con medio MRS más L-cisteína en los cuales se reemplazará la fuente de carbono con 2% de POS. Después de 48 h de fermentación se determinará, pH del medio, biomasa (por recuento en placa y/o densidad óptica), consumo de POS, ácidos orgánicos y ácidos grasos de cadena corta. Los resultados permitirán concluir si las características de los POS como peso molecular, con o sin insaturación, esterificados o no, tienen influencia en las características probióticas; con lo cual se podrá seleccionar el o los POS con mejores características prebióticas.