Project name
Momento de blastulación monitoreada por tecnología time-lapse para seleccionar embriones viables
Acronym
SUB-TESIS-UNALM-2020-002-007-FZ
Project code
118002500
Status
Finished
Start Date
26 December 2020
End Date
01 June 2022
OCDE knowledge area(s)
Ciencia animal, Ciencia de productos lácteos
OCDE activity
Investigación aplicada
Keyword(s)
Bovinos Viabilidad in vitro Blastocistos
Resume
Tradicionalmente, la selección de embriones bovinos para transferencia se basa en sus características morfológicas por ser simple y rápido, sin embargo, los valores cualitativos tienen una baja precisión para predecir competencia embrionaria. Por lo tanto, es necesario incluir medidas de características objetivas y no invasivas como el tiempo de blastulación, para incrementar la precisión del método de selección. El objetivo de este estudio fue evaluar el momento de blastulación monitoreada por tecnología time-lapse para seleccionar embriones con viabilidad in vitro determinada por desarrollo post eclosión. Los complejos de ovocitos cumulus (COCs) se maduraron durante 23 horas y luego se fertilizaron mediante la incubación de COCs con espermatozoides (10.000 espermatozoides por ovocito) durante 18 horas. Los presuntos cigotos se colocaron individualmente en micropocillos, en gotas de medio de cultivo comercial. El sistema Primo Vision TL (EVO+; Vitrolife, Gotemburgo, Suecia) capturó imágenes digitales de embriones en desarrollo cada 15 minutos. Se registraron los periodos de tiempo desde la FIV hasta el inicio de la blastulación (tSB) y el desarrollo del blastocisto (tB). La viabilidad in vitro de los embriones se determinó utilizando un sistema de cultivo in vitro extendido de embriones bovinos hasta el día 9,5 (desarrollo posterior a la eclosión). Los parámetros para establecer la viabilidad in vitro (día 9,5 después de la FIV) fueron: diámetro superior a 200 µm y recuento total de células de blastocisto superior a 190. Para determinar el poder predictivo de la blastulación temprana (valor 1) o tardía (valor 0) se estimaron mediante el área bajo la curva ROC (AUC). Además, se utilizó análisis de regresión logística binaria para generar un modelo matemático con variables morfocinéticas que permite la más alta predicción de la viabilidad in vitro. En 13 sesiones, la tasa de producción de blastocistos ascendió a 46,2% (96/208). El punto de corte del tiempo para discriminar como blastulación temprana o tardía fue de 149.8 h. La viabilidad in vitro de los embriones con blastulación temprana fue de 63,3 % (31/49), siendo superior estadísticamente (p=0,001) al grupo de blastulación tardía 14,9% (7/47). Asimismo, el momento de blastulación mostró una precisión del 90,8 % (IC 95 %, 0,833–0,983; P < 0,001) para predecir la viabilidad in vitro. En conclusión, el tiempo de blastulación permite predecir la viabilidad in vitro del embrión bovino.
Institutional research line
Mejoramiento Genético y Reproducción Animal [Línea de investigación]
Geographical scope of study or application of the project
La Molina, Lima
-12.0804
-76.9495
Sources of information: Directorio de Proyectos Universidad Nacional Agraria La Molina